研究背景与致病机制 - 单基因诊断的神经发育障碍主要通过单倍体不足机制致病 即一个基因的两个拷贝中仅有一个保持功能[3] - SCN2A基因单倍体不足是神经发育障碍最常见病因之一 常表现为自闭症、智力残疾 部分患儿伴发难治性癫痫[3] CRISPRa技术原理 - CRISPR激活技术使用切割活性丧失的dCas9与转录激活蛋白融合 实现对特定基因的激活并增加基因表达水平[5] - 该技术保留Cas9结合DNA能力但不切割DNA双链 通过gRNA靶向结合目标DNA序列[5] 动物模型研究结果 - 在相当于人类10岁的青春期小鼠模型中 CRISPRa技术成功恢复大脑中SCN2A水平并逆转神经发育障碍[3][6] - 腺相关病毒递送的CRISPRa矫正了新皮质锥体细胞的内在缺陷和突触缺陷 这是导致神经发育障碍的主要细胞类型[6] - 全身系统性递送的CRISPRa使Scn2a+/−小鼠模型对抗化学诱导的癫痫发作[7] 人类细胞验证 - AAV-CRISPRa治疗挽救了SCN2A单倍体不足的人类干细胞来源神经元的兴奋性异常[7] 治疗潜力与商业应用 - 研究证明即使在青春期阶段进行干预仍可改善神经发育表型[8] - 大脑解剖结构完好但神经元突触无法成熟 提高SCN2A水平可使突触恢复正常并预防癫痫发作[8] - Regel Therapeutics公司已从加州大学旧金山分校获得该技术授权 用于开发治疗SCN2A单倍体不足的疗法[8]