基因编辑技术CRISPR-Cas9的应用价值 - CRISPR-Cas9技术因其高效、精准和可编程特性成为生物医学研究核心工具 推动基础生命科学发展和遗传病、肿瘤等重大疾病治疗策略创新 [1] - 功能细胞（尤其是免疫细胞和干细胞）的基因改造受到重点关注 原代T细胞是CAR-T、TCR-T等细胞疗法的重要载体 NK细胞是CAR-NK等免疫治疗的热点对象 干细胞编辑在再生医学中展现广阔前景 [1] 原代细胞基因编辑面临的递送挑战 - 原代免疫细胞和干细胞具有高度生理敏感性、有限体外扩增能力和低外源物质摄入效率 导致CRISPR组件递送成为关键瓶颈 [2] - 化学转染试剂（如脂质体）在原代细胞中效率低下且细胞毒性显著 电穿孔技术导致细胞存活率大幅下降和功能丧失 病毒载体存在插入突变风险、免疫原性及高成本问题 [2] 理想递送系统的核心要求 - 需兼具高转染效率、低细胞毒性、良好细胞功能维持和临床转化潜力 以提升基因编辑效率和临床应用可行性 [3] CRISPR-Cas9工作机制 - 系统源于细菌免疫机制 Cas9蛋白负责切割DNA双链 sgRNA引导靶向特定基因序列 具备高度可编程性和靶向特异性 [5][7] - 递送效率是发挥编辑作用的关键前提 尤其在难转染的原代免疫细胞和干细胞中 [8] ProteanFect递送系统的技术创新 - 基于生物分子凝聚体技术 模拟细胞内相分离现象 通过内吞途径温和递送RNP或mRNA-sgRNA复合物 避免细胞应激损伤 [9] - 操作流程包括凝聚体组装、细胞摄取、胞内释放与转运、靶向编辑 实现高效基因编辑 [11] - 规避电穿孔的高死亡率和病毒载体安全风险 编辑效率优于传统化学转染 保持细胞高存活率和功能完整性 [13] 实际应用性能数据 - 小鼠原代T细胞编辑中DNA突变率达84.3% 蛋白敲低效率达86.3% [14] - 人原代T细胞编辑中TRAC突变率达80.1% 蛋白敲低效率达85% [16] - iPSC编辑中碱基替换效率达55% 验证干细胞高效编辑能力 [17] 行业影响与公司定位 - 创新递送技术推动基因编辑从高难度操作向标准化流程转变 提升实验可重复性并为临床前研究提供平台 [13] - 公司专注于核酸递送领域 基于哺乳动物内源蛋白开发凝聚体递送平台 产品覆盖多种难转细胞系和原代细胞 [24][25] - 产品系列包括ProteanFect转染试剂盒、CRISPRMax mRNA编辑试剂盒和CRISPRMax Ultra RNP编辑试剂盒 针对不同细胞类型提供解决方案 [25]