研究核心观点 - 开发了一种基于CRISPR-Cas9的纳米疫苗（AVAX），通过精准敲除血红素氧合酶-1（HO-1）基因，长效逆转肿瘤细胞对活性氧（ROS）的耐受性，显著增强光动力疗法（PDT）的疗效[3] - 创新性提出利用基因编辑技术的遗传效应长效消除肿瘤耐受，为实体瘤免疫治疗提供了新策略[4] - 该策略通过对肿瘤细胞进行遗传改造，永久改变其对ROS的敏感性，为原位疫苗开发提供新思路[6] 技术平台与作用机制 - AVAX采用核壳式自组装结构，实现CRISPR-Cas9系统的高效递送，靶向敲除HO-1基因[6] - 透明质酸外壳靶向CD44受体，增强肿瘤富集；精氨酸修饰的聚乙烯亚胺内核高效携载编辑系统，并可缓解肿瘤缺氧微环境[8] - 单次静脉注射联合近红外光照，即可实现20.15%的肿瘤细胞内HO-1基因编辑效率[6] - 编辑后的ROS敏感表型可遗传至子代肿瘤细胞[8] 临床前疗效数据 - 在B16F10黑色素瘤和LL/2肺癌模型中，AVAX联合光动力治疗实现93%的肿瘤抑制率[8] - 与PD-L1抗体联用时，50%的荷瘤小鼠肿瘤完全消退，生存期超过50天[8] - 在肺转移模型中，肺转移结节数下降为原来的不足1/20[9] - 可激活系统性抗肿瘤免疫，治疗组肿瘤中CD8 T和CD4 T细胞浸润显著增加，免疫抑制性髓源细胞明显减少[8] 安全性评估 - 该纳米疫苗对主要器官无显著毒性[9] - 未在免疫细胞中检测到脱靶编辑[9]